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產品展示   ProductsATCC細胞>>轉化細胞>>膽管細胞型肝癌細胞;HCCC-9810
 
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產品名稱:
膽管細胞型肝癌細胞;HCCC-9810
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產品特點:
膽管細胞型肝癌細胞;HCCC-9810相關產品:L-甘-纈二肽1963-21-9
Rink Amide AM樹脂
GST瓊脂糖凝膠4FF
變色硅膠112926-00-8
14987-04-3
  膽管細胞型肝癌細胞;HCCC-9810的詳細資料:

公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:

產品名稱

生長特性

貨號

膽管細胞型肝癌細胞;HCCC-9810

貼壁生長

EY-X63428

細胞名稱  膽管細胞型肝癌細胞;HCCC-9810
形態(tài)特性: 上皮樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: HCCC-9810細胞株源自一位女性肝膽管細胞癌患者。HCCC-9810細胞呈上皮細胞樣,染色體眾數為71,但染色體數目可以在22-117的范圍內變動。倍增時間為20.4小時。AFP、CEA和CA19-9的分泌水平低,在裸鼠中的成瘤率為20%。

培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

傳代方法: 1:3~1:4傳代,2~3天1次

傳代情況: C4

凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 培養(yǎng)法(-)
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
vHHV8-ORF74 MAb (Cl 462510) (100 UG)細胞名稱: 小鼠胚胎成纖維細胞(來自NIH3T3);PA12 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

vH1N1-NA Biot Aff Pur PAb (50 UG)細胞名稱: 骨肉瘤細胞;HOS MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS;1%NEAA

vH1N1-NA Aff Pur PAb (100 UG)細胞名稱: 慢性髓系白血病細胞;K562 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

vCMV UL147 MAb (Cl 146326) (500 UG)細胞名稱: 前列腺癌細胞;LNCaP RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

vCMV UL147 Aff Pur PAb (100 UG)細胞名稱: 癌細胞;MCF7B DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

vCMV UL146/Y18 MAb (76520) (500 UG)細胞名稱: 小鼠紅白血病細胞;MEL RPMI1640(w/oHepes)20%FBS

vCMV UL146/vCXC1 Aff Pur PAb (100 UG)細胞名稱: 神經母細胞瘤細胞;SH-SY5Y RPMI1640(w/oHepes)15%滅活FBS

vCMV UL146 Biot Aff Pur PAb (50 UG)細胞名稱: 急性淋巴母細胞性白血病細胞;MOLT-4 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

vCCI MAb (Cl 112803) (500 UG)細胞名稱: 小細胞肺癌細胞;NCI-H209 RPMI1640(w/oHepes)20%FBS

vCCI MAb (112811) (500 UG)細胞名稱: 卵巢腺癌細胞;SK-OV-3 McCoy's5AMedia(ModifiedwithTricine)10%FBS

vCCI Biot Aff Pur PAb (50 UG)細胞名稱: urkitt淋巴瘤細胞;RAJI RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

vCCI Aff Pur PAb (100 UG)細胞名稱: 胚肺成纖維細胞;MRC-5 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

VasoTACS in Situ Apop Det Kit (30 TESTS)細胞名稱: B淋巴細胞瘤細胞;RAMOS(RA.1) RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Va24-JaQ Aff Pur PAb (100 UG)細胞名稱: 腦瘤細胞;SF126 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

UVDE/Buffer (100 ML)細胞名稱: 腦瘤細胞;SF763 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

UVDE FLARE Assay Kit (75 TESTS)細胞名稱: 小鼠血細胞;WEHI-3[WEHI3] DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
膽管細胞型肝癌細胞;HCCC-9810豬白介素10(IL-10)ELISA試劑盒IL-1ELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

豬白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒IL-1ELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

豬白介素18(IL-18)ELISA試劑盒IL-1ELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

豬白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒IL-1raELISAkit產品規(guī)格:48T/96T。

豬白介素2(IL-2)ELISA試劑盒IL-1raELISAkit產品規(guī)格:48T/96T。

豬白介素3(IL-3)ELISA試劑盒IL-1raELISAkit產品規(guī)格:48T/96T。

豬白介素4(IL-4)ELISA試劑盒IL-1raELISAkit產品規(guī)格:48T/96T。

豬白介素6(IL-6)ELISA試劑盒IL-1raELISAkit產品規(guī)格:48T/96T。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

產品相關關鍵字: 膽管細胞型肝癌細胞 HCCC-9810
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